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          微生物菌種藥物敏感性試驗

          作者:小編 更新時間:2022-04-02 點擊數:

          微生物菌種藥物敏感性是測定微生物菌種對抗菌藥物的耐受程度,主要通過測定抗菌藥物對待測微生物的最低抑菌濃度(Minimum Iinhibitory Concentration, MIC)來實現。


          目前,微生物藥物敏感性檢測主要依據CLSI、EFSA、EUCAST、ISO、WS等國內外標準進行,檢測方法包括紙片擴散法、肉湯/瓊脂稀釋法和Etest法。其中Etest法是綜合利用擴散法和稀釋法的原理,預先設定連續穩定的抗菌藥物濃度梯度進行抗菌藥物MIC值的定量檢測,實現制藥、食品、飼料等行業生產用菌株的藥物敏感性測定。


          檢測項目:


          服務類型服務周期

          大腸桿菌抑菌功能

          30個工作日

          金黃色葡萄球菌抑菌試驗

          30個工作日

          其他特定菌抑菌實驗

          30個工作日

          最低抑菌濃度(MIC)檢測

          30個工作日

          特定菌的菌落數測定

          30個工作日


          檢測菌種:


          類型名稱編號

          細菌

          大腸桿菌

          CMCC(B)44102

          大腸桿菌

          ATCC25922

          金黃色葡萄球菌

          CMCC(B)26003

          金黃色葡萄球菌

          ATCC6538

          枯草桿菌

          CMCC(B)63501

          枯草芽孢桿菌

          ATCC6633

          銅綠假單胞菌

          CMCC(B)10104

          生孢梭菌

          CMCC(B)64941

          產氣腸桿菌

          ATCC13048

          植物乳桿菌

          ACCC11095

          糞腸球菌

          ATCC29212

          真菌

          白色念珠菌

          CMCC(F)98001

          黑曲霉菌

          CMCC(F)98003

          釀酒酵母

          ATCC9763

          桔青霉菌

          ATCC1109


          檢測方法:



          1  紙片法


          紙片法也被稱作紙片擴散法,是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴散。在藥物擴散的同時,紙片周圍抑菌濃度范圍內的測試菌不能生長,而抑菌濃度范圍外的菌株則繼續生長,從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈。


          不同抗菌藥物抑菌圈的直徑因受藥物在瓊脂中的擴散速率的影響而可能不同,抑菌圈的大小可反映測試菌對測定藥物的敏感程度,并與該藥對測試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負相關,即抑菌圈越大,MIC越小。


          紙片法目前已經被認為是一種權威的用藥指導依據,但由于該方法只能定性,因此紙片法通常被用來做藥物敏感性試驗。


          2  牛津杯法


          牛津杯法又稱杯碟法,將已滅菌的牛津杯置于試驗平板中,往杯中注入一定量的待測樣品,培養一段時間后測定抑菌圈大小的一種方法。由于待測樣的抑菌效果不同,因此抑菌圈的大小也會不同。


          3  二倍稀釋法


          在抑菌實驗中,為了評判某種藥物的抗菌功效,最低抑菌濃度(MIC)是非常重要的指標,利用二倍稀釋法可以得到MIC值。凡能抑制試驗菌生長的最高藥物稀釋度為該藥的最低抑菌濃度(MIC)。


          將待檢藥物先以合適的液體培養基在試管或96孔板內進行連續稀釋,每管內再加入一定量實驗菌液,培養后,觀察細菌生長情況,與空白對照比較,以肉眼觀察培養基清亮且未見細菌生長的最低濃度判定為該藥物的最低抑菌濃度。將無細菌生長的藥物和菌種劃線接種到新的瓊脂平板上進行培養,進一步確定該藥物的MIC。通常每菌重復3次,求平均值。


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